Биохимия животных Электронный дидактический комплекс (эдк). Биохимия животных
Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже
Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.
Размещено на http://www.allbest.ru/
Что называется буферным действием? Вычислите pH буферного раствора, состоящего из 4 мл угольной кислоты и 16 мл гидрокарбоната натрия одинаковой концентрации константа электролитической диссоциации угольной кислоты равна 3,7*10
Что называется буферным действием? Вычислите pH буферного раствора, состоящего из 4 мл угольной кислоты и 16 мл гидрокарбоната натрия одинаковой концентрации константа электролитической диссоциации угольной кислоты равна 3,7*10 -7
жирорастворимый витамин мочевина глицерин
Буферными системами называются растворы, способные сохранять кислотно-основный баланс при добавлении небольших количеств кислот или щелочей.
Способность системы поддерживать практически неизменным значение рН называется буферным действием, а количество кислоты или щелочи, добавленное к 1л буферной системы для изменения рН на единицу, называется буферной емкостью системы.
Для того, чтобы система обладала буферным действием, в ее составе должны присутствовать два электролита - сильный (как правило, это соль) и слабый (основание или кислота). В зависимости от состава, различают кислотные или основные буферные системы.
Как изменяются свойства белков в изоэлектрическом состоянии? Желатин помещен в буферный раствор с pH=3. Определите знак заряда частиц желатина, если изоэлектрическая точка его 4,7
Высокомолекулярные электролиты или полиэлектролитами содержат ионогенные группы, по которым могут проходить процессы электролитической диссоциации. Белковые молекулы как продукты конденсации аминокислот содержат основные группы -NH2 и кислотные -СООН. Такие соединения называются амфолитами, т.е. они способны диссоциировать и по кислотному, и по основному типу в зависимости от pH среды. В водном растворе аминокислоты и белки находятся преимущественно в виде биполярных ионов (внутренних солей):
В кислой среде, когда в результате избытка водородных ионов подавлена ионизация карбоксильных групп, молекула белка ведет себя как основание, приобретая положительный заряд:
В щелочной среде, наоборот, подавлена ионизация аминогрупп, и молекула белка ведет себя как кислота:
Однако при определенной величине pH степень диссоциации амино и карбоксильных групп приобретает одинаковое значение, и тогда макромолекулы белка становятся электронейтральными. Подобное состояние белковой молекулы называют изоэлектрическим. В таком состоянии свойства белковых растворов резко меняются: уменьшается вязкость, снижается растворимость белка, изменяется даже форма макромолекул.
Значение рН, при котором наступает изоэлектрическое состояние белков, называют изоэлектрической точкой (ИЭТ).
У разных белков изоэлектрическая точка соответствует различным значениям рН. У большей части растительных белков она принимает значение при рН несколько выше 7,0, вследствие чего они несут отрицательный заряд.
Как уже отмечалось, раствор белка является одним из компонентов протоплазмы клетки. Изоэлектрическое состояние белковой молекулы приводит к резкому снижению устойчивости и подвижности белковых коллоидных частиц. Такие частицы обладают минимальной адсорбционной способностью, плохо набухают. В результате в ИЭТ наблюдаются слипание частиц, коагуляция и разрушение коллоидной системы, что в конечном итоге сказывается на обменных процессах в клетке.
Дайте характеристику жирорастворимых витаминов. Опишите биологическую роль витаминов А и Д
Одними из самых важных характеристик жирорастворимых витаминов являются хорошая растворимость в липидах, гидрофобность, способность накапливаться в организме. В организм жирорастворимые витамины поступают из продуктов растительного и животного происхождения, в которых имеются натуральные масла и жиры.
Важно отметить тот факт, что часть жирорастворимых витаминов является антиоксидантами, обеспечивающими организму защиту от свободных радикалов.
Данный тип витаминов хранится преимущественно в печени и жировой ткани. Дефицит и передозировка их ощутима не сразу.
Витамин А
Он содержится только в продуктах животного происхождения. В чистом виде это кристаллическое вещество светло-желтого цвета, хорошо растворяется в жире. Неустойчив к действию кислот, ультрафиолету, кислороду воздуха.
Растительные пигменты каротиноиды играют роль провитамина А. Каротиноиды (от латинского carota -- морковь) относятся к углеводородным соединениям, которые в растениях обычно связаны с белками.
Превращение каротина в витамин А происходит в стенке тонких кишок и в печени.
Физиологическое значение витамина А. Витамин А оказывает влияние на развитие молодых организмов, состояние эпителиальной ткани, на процессы роста и формирования скелета, ночное зрение. Так, адаптация зрения к условиям различной освещенности длится около 8 минут при нормальных запасах витамина А и 30--40 минут -- при уменьшении их наполовину. Витамин А участвует в нормализации состояния и функции биологических мембран.
В сочетании с витамином С он вызывает уменьшение липоидных отложений в стенках сосудов и снижение содержания холестерина в сыворотке крови.
Особенно витамин А нужен щитовидной железе, печени и надпочечникам. Он один из витаминов, сохраняющих молодость. Например, он продлевает жизнь подопытным животным.
Особенно много витамина А в печени морских животных. Вот почему препараты из печени этих животных (например, «катрэкс» -- из печени черноморской акулы катрана) очень ценны.
Витамин А нужен ушам. Его нехватка может привести к ушным инфекциям и отразиться на механизме слуха. Его с большим успехом применяют в аллергической терапии. Установлено, что приступ сенной лихорадки можно полностью отразить принятием 150000 ME витамина А. Зарубежные врачи называют его «первой линией обороны от болезней», так как целостность покровов и эпителия внутри тела, нормальная их работа -- первое условие здоровья.
Недостаток витамина А широко распространен. Из-за этого происходит замедление реакции организма.
Вообще проблема дефицита витамина А остро стоит во всем мире. Производится лечение витамином А. Так, в Индии детям в возрасте 1--5 лет раз в полгода дают по 110 миллиграммов витамина А (200 000 ME, или 40 взрослых норм сразу!). Среди детей, получивших две дозы, заболеваемость глаз сократилась на 75 процентов.
Запасы витамина А могут в печени составлять резерв 500-дневной потребности. Они откладываются в печени в форме эфира высших жирных кислот: олеиновой, пальмитиновой и стеариновой, и, возможно по этой причине, несмотря на столь высокие запасы, не наблюдается явлений гапервитаминоза. Заметим, что витамин А накапливается в печени из каротина, но не из витаминной диеты. Среди сельского населения острова Ява, питающегося неполированным рисом, зелеными овощами и фруктами, не наблюдается признаков нехватки витамина А. Наоборот, установлено, что снабжение витамином А достаточно полноценно, хотя их пища не содержит молока, масла и почти лишена яиц.
Потребность в витамине А составляет 1,5 мг/сутки, что равняется приблизительно 5000 ME (1 ME=0,3 мг), причем не менее 1/3 потребности должно быть удовлетворено за счет самого витамина А, а 2/3 -- за счет в-каротина.
Уменьшают запасы витамина А алкоголь, канцерогены, висмут; сильное уменьшение в диете белка (с 18 до 3%) уменьшает отложение этого витамина в печени более чем 2 раза.
Разрушает его кислород воздуха, кислоты, ультрафиолетовые лучи. Прогоркание жиров ведет к разрушению витамина А.
Важнейшие источники витамина А: печень, сливочное масло, сливки, сыр, яичный желток, рыбий жир. При тепловой обработке витамин А значительно разрушается.
Витамин Д
Известны около семи веществ, обладающих антирахитической активностью, из которых витамин Д наиважнейший. При действии на кожу ультрафиолетовых лучей образуется холекальциферол (витамин Д3) из своего провитамина, содержание которого особенно высоко в коже, обладающей высокой витаминной активностью. В растительных организмах содержится эргостерин, являющийся провитамином Д.
Физиологическое значение. Витамин Д нормализует всасывание из кишечника солей кальция и фосфора, способствует отложению в костях фосфора и фосфата кальция (то есть укрепляет зубы) и препятствует заболеванию рахитом.
Имеются также указания на роль витамина Д в определении ряда свойств мембран клетки и субклеточных структур, в частности их проницаемости для ионов кальция и других катионов.
Применение с лечебной целью, а также в качестве профилактики витамина Д требует предосторожности: они токсичны.
Опишите процесс биосинтеза мочевины у млекопитающих (уреотелических) животных
Мочевина - конечный продукт белкового обмена у так называемых уреотелических животных и человека. При поступлении с дневным пищевым рационом 100--120 г белков с мочой за сутки выделяется 20--25 г мочевины (по другим данным, 20--30 г). Синтезируется мочевина в печени из СО2, аммиака и азота б-аминогрупп L-аспарагиновой кислоты в результате циклической последовательности биохимических реакций, получившей название цикла мочевины (цикл аргинина -- мочевины, орнитиновый цикл, цикл Кребса -- Хензелейта). В результате происходит обезвреживание токсического Аммиака путем образования водорастворимой мочевины, выводимой из организма с мочой (пропорционально клубочковой фильтрации в почках).
На первом этапе цикла мочевины происходит образование карбамоилфосфата из СО2 и аммиака, эту реакцию катализирует карбамоилфосфатсинтаза в присутствии М-ацетилглутамата. Второй этап -- биосинтез L-цитруллина из L-орнитина и карбамоилфосфата, катализируемый орнитинтранскарбамилазой. Третьим этапом цикла является синтез аргининянтарной кислоты из L-цитруллина и L-аспарагиновой кислоты, катализируемый аргининосукцинат-синтетазой. Четвертый этап -- превращение аргининянтарной кислоты в L-аргинин и фумаровую кислоту, катализируемое аргининсукциназой. На пятом, заключительном этапе цикла мочевины осуществляется гидролитическое расщепление L-аргинина под действием фермента аргиназы с образованием мочевины и L-орнитина, который служит субстратом для реакции второго этапа цикла мочевины.
Цикл мочевины протекает в печени. Превращение L-орнитина в L-цитруллин и синтез карбамоилфосфата локализованы в матриксе митохондрий, а все другие реакции цикла -- в цитоплазме. Митохондрий клеток почек не содержат ферментов, необходимых для превращения L-орнитина в L-цитруллин и синтеза карбамоилфосфата. Однако в почках происходит синтез мочевины из цитруллина, поступающего из печени.
Цикл мочевины тесно связан с основными путями обмена веществ и энергии. Так, фумаровая кислота, образующаяся в цикле мочевины, может поступать в митохондрий и превращаться там в цикле трикарбоновых кислот в щавелевоуксусную кислоту; СО2 и основная часть энергии в форме АТФ поступают в цикл мочевины из цикла трикарбоновых кислот, а аммиак образуется «реакциях трансаминирования и дезаминирования, которые иногда дают промежуточные продукты цикла трикарбоновых кислот. При нарушении цикла мочевины может происходить не гидролиз L-аргинина, а перенос его амидиновой группировки на глицин с образованием вместо М. гуанидинуксусной кислоты -- биосинтетического предшественника креатина.
Содержание мочевины в сыворотке крови зависит от скорости ее синтеза и выделения и является одним из основных биохимических признаков нормального или нарушенного функционирования почек и печени. Из фракций остаточного азота при нарушении функции почек прежде всего повышается абсолютное и относительное содержание азота М. При почечной недостаточности азот может составлять до 90% всего остаточного азота. Выраженное увеличение концентрации мочевины в сыворотке крови (выше 15 ммоль/л, или 90 мг/ 100 мл; азота мочевины выше 30 ммоль/л, 42 мг/ 100 мл), как правило, всегда свидетельствует о нарушении функции почек (хронической и острой почечной недостаточности), особенно, если одновременно в моче появляются белок, гиалиновые цилиндры, клетки. С нарастанием болезни мочевина начинает проходить через слизистую оболочку желудочно-кишечного тракта. В его просвете под действием бактериальной уреазы образуется аммиак. Мочевина и аммиак раздражают слизистую оболочку органов желудочно-кишечного тракта, что ведет к ее токсическому воспалению (гастриту, дуодениту и др.). Повышение содержания мочевины в сыворотке крови может быть вызвано и внепочечными причинами: обезвоживанием организма, усиленным распадом белков (острая желтая дистрофия печени, злокачественные опухоли и др.). Понижение концентрации мочевины в сыворотке крови отмечают при повышенной скорости клубочковой фильтрации, например у беременных молодых женщин, при нагрузке чрезмерным объемом внутривенных вливаний. Иногда содержание мочевины в крови понижается при патологическом изменении значительной части паренхимы печени, недостаточности белка в питании, продолжительном голодании, врожденном нарушении нормального протекания цикла мочевины (у детей).
Схема цикла мочевины: Ф неорг. -- неорганический фосфат; МочевинаФ -- фосфат, присоединенный макроэргической связью; ФФ неорг. -- неорганический пирофосфат; пунктиром обведены группы атомов, принимающие непосредственное участие в образовании молекулы мочевины.
В чем отличие гликолиза от гликогенолиза? Напишите уравнение реакции образования 6-фосфат глюкозы
Анаэробный путь распада углеводов может начинаться как с распада глюкозы -- и тогда он будет называться гликолизом, так и с распада гликогена -- гликогенолиз. В основном этот путь распада характерен для мышц.
Сущность анаэробного распада глюкозы заключается в расщеплении молекулы глюкозы на две молекулы молочной кислоты и в освобождении энергии, которая частично расходуется в виде тепла, а частично накапливается в виде АТФ. При этом гликолиз дает две, а гликогенолиз -- три молекулы АТФ.
Гликогенолиз начинается с отщепления от гликогена под действием фермента фосфорилазы одной молекулы глюкозы в виде глюкозо-1-фосфата, которая изомеризуется в глюкозо-6-фосфат. При гликолизе ферментом гексокиназой при участии АТФ (как источника энергии) глюкоза также превращается в глюкозо-6-фосфат.
Начиная с данного этапа, два процесса идут одинаково. Таким образом, различие гликолиза и гликогенолиза существует только до образования глюкозо-6-фосфата.
В анаэробных условиях гликолиз - единственный процесс в животном организме, поставляющий энергию. Именно благодаря гликолизу организм человека и животных определенный период может осуществлять ряд физиологических функций в условиях недостаточности кислорода. В тех случаях, когда гликолиз протекает в присутствии кислорода, говорят об аэробном гликолизе.
Последовательность реакций анаэробного гликолиза, так же как и их промежуточные продукты, хорошо изучена. Процесс гликолиза катализируется одиннадцатью ферментами, большинство из которых выделено в гомогенном, кристаллическом или высокоочищенном виде и свойства которых достаточно известны. Заметим, что гликолиз протекает в гиало-плазме (цитозоле) клетки.
Первой ферментативной реакцией гликолиза является фосфорили-рование, т.е. перенос остатка ортофосфата на глюкозу за счет АТФ. Реакция катализируется ферментом гексокиназой:
Образование глюкозо-6-фосфата в гексокиназной реакции сопровождается освобождением значительного количества свободной энергии системы и может считаться практически необратимым процессом.
Наиболее важным свойством гексокиназы является ее ингибирование глюкозо-6-фосфатом, т.е. последний служит одновременно и продуктом реакции, и аллостерическим ингибитором.
Фермент гексокиназа способен катализировать фосфорилирование не только D-глюкозы, но и других гексоз, в частности D-фруктозы, D-маннозы и т.д. В печени, кроме гексокиназы, существует фермент глюкокиназа, который катализирует фосфорилирование только D-глюкозы.
Биосинтез глицерина. Напишите уравнение реакции восстановления глицеринового альдегида в глицерин
В природе глицерин широко распространен в форме глицеридов - основных компонентов природных жиров и растительных масел. Он играет важную роль в жировом обмене --совокупности обменных процессов нейтральных жиров и их биосинтеза в организме животных и человека, обеспечивающих живую клетку энергией.
Ацилглицерины (нейтральные жиры, или глицериды)- глицериновые эфиры жирных кислот. Они составляют главный компонент жиров, запасаемых в растительных и животных клетках, особенно в жировых клетках позвоночных.
Под действием липаз, присутствующих в соке поджелудочной железы, происходит гидролиз триацилглицеринов на жирные кислоты и глицерин.
Глицерин, необходимый для синтеза жиров, образуется путём восстановления фосфоглицеринового альдегида.
При биосинтезе глицерина в кислой среде происходит восстановление карбонильной группы глицеральдегида до глицерина при помощи NADH (никотинамид аденин динуклеотид в восстановленной форме). Реакция катализируется ферментом альдегид-редуктазой.
Строение и функции гемоглобина
Гемоглобин -- сложный железосодержащий белок кровосодержащих животных, способный обратимо связываться с кислородом, обеспечивая его перенос в ткани. У позвоночных животных содержится в эритроцитах, у большинства беспозвоночных растворён в плазме крови (эритрокруорин) и может присутствовать в других тканях.
Главная функция гемоглобина состоит в переносе кислорода. У человека в капиллярах лёгких в условиях избытка кислорода последний соединяется с гемоглобином. Током крови эритроциты, содержащие молекулы гемоглобина со связанным кислородом, доставляются к органам и тканям, где кислорода мало; здесь необходимый для протекания окислительных процессов кислород освобождается из связи с гемоглобином. Кроме того, гемоглобин способен связывать в тканях небольшое количество диоксида углерода (CO2) и освобождать его в лёгких. Монооксид углерода (CO) связывается с гемоглобином крови намного сильнее (почти в 500 раз), чем кислород, образуя карбоксигемоглобин (HbCO). Некоторые процессы приводят к окислению иона железа в гемоглобине до степени окисления +3. В результате образуется форма гемоглобина, известная как метгемоглобин (HbOH) (metHb, от мета… и гемоглобин, иначе гемиглобин или ферригемоглобин, см. Метгемоглобинемия). В обоих случаях блокируются процессы транспортировки кислорода. Впрочем, монооксид углерода может быть частично вытеснен из гема при повышении парциального давления кислорода в легких.
Гемоглобин является сложным белком класса хромопротеинов, то есть в качестве простетической группы здесь выступает особая пигментная группа, содержащая химический элемент железо -- гем. Гемоглобин человека является тетрамером, то есть состоит из четырёх субъединиц. У взрослого человека они представлены полипептидными цепями б1, б2, в1 и в2. Субъединицы соединены друг с другом по принципу изологического тетраэдра. Основной вклад во взаимодействие субъединиц вносят гидрофобные взаимодействия. И б, и в-цепи относятся к б-спиральному структурному классу, так как содержат исключительно б-спирали. Каждая цепь содержит восемь спиральных участков, обозначаемых буквами A-H (От N-конца к C-концу).
Гем представляет собой комплекс протопорфирина IX, относящегося к классу порфириновых соединений, с атомом железа(II). Эта простетическая группа нековалентно связана с гидрофобной впадиной молекул гемоглобина и миоглобина.
Железо(II) характеризуется октаэдрической координацией, то есть связывается с шестью лигандами. Четыре из них представлены атомами азота порфиринового кольца, лежащими в одной плоскости. Две других координационных позиции лежат на оси, перпендикулярной плоскости порфирина. Одна из них занята азотом остатка гистидина в 93 положении полипептидной цепи (участок F). Связываемая гемоглобином молекула кислорода координируется к железу с обратной стороны и оказывается заключённой между атомом железа и азотом ещё одного остатка гистидина, располагающегося в 64 положении цепи (участок E).
Всего в гемоглобине человека четыре участка связывания кислорода (по одному гему на каждую субъединицу), то есть одновременно может связываться четыре молекулы. Гемоглобин в легких при высоком парциальном давлении кислорода соединяется с ним, образуя оксигемоглобин. При этом кислород соединяется с гемом, присоединяясь к железу гема на 6-ю координационную связь. На эту же связь присоединяется и моноксид углерода, вступая с кислородом в «конкурентную борьбу» за связь с гемоглобином, образуя карбоксигемоглобин.
Связь моноксида углерода с гемоглобином более прочная, чем с кислородом. Поэтому часть гемоглобина, образующая комплекс с моноксидом углерода, не участвует в транспорте кислорода. В норме у человека образуется 1,2 % карбоксигемоглобина. Повышение его уровня характерно для гемолитических процессов, в связи с этим уровень карбоксигемоглобина является показателем гемолиза.
Список используемой литературы
1. Афонский С. И. Биохимия животных. М.: Высш. шк., 1960.
2. Болдырев А. И. Физическая и коллоидная химия. М.: Высш. шк., 1983.
3. Завьялова В. К., Сычева Л. В. Биохимия животных с основами физической и коллоидной химии. Учебно-методическое пособие. Пермь 2004.
Размещено на Allbest.ru
...Подобные документы
Витамины как один из факторов питания человека. Биологическая роль витаминов. Номенклатура и классификация витаминов. Понятие рекомендуемой суточной нормы. Понятие гипо-, гипер- и авитаминоза. Характеристика жирорастворимых и водорастворимых витаминов.
реферат , добавлен 27.05.2015
Клетка как элементарная единица строения и жизнедеятельности организмов. Молекулярная масса белков, методы ее определения. Классификация белков по степени сложности. Виды нуклеиновых кислот, их биологическая роль. Витамины в питании человека и животных.
контрольная работа , добавлен 17.10.2015
Роль микроорганизмов в природе и сельском хозяйстве. Аммонификация мочевины: уравнение реакции, характеристика уробактерий, значение процесса. Разложение мочевины под влиянием уреазы. Корневая и прикорневая микрофлора, её состав и влияние на растения.
контрольная работа , добавлен 23.12.2010
Роль эндокринной системы в регуляции основных процессов жизнедеятельности животных и человека. Свойства, классификация, функции, и биологическая роль гормонов эндокринных желез. Анализ проблемы йоддефицитных заболеваний человека и животных в России.
курсовая работа , добавлен 02.03.2010
Зоология – научная дисциплина, изучающая животный мир, крупная составная часть биологии. Обзор общих черт млекопитающих, отличающих их от других животных, специфические особенности их строения и поведения. Агрессивность хищника по отношению к жертве.
реферат , добавлен 01.05.2010
Биологическая химия как наука, изучающая химическую природу веществ живых организмов. Понятие витаминов, коферментов и ферментов, гормонов. Источники жирорастворимых и водорастворимых витаминов. Понятие обмена веществ и энергии, обмена липидов и белков.
курс лекций , добавлен 21.01.2011
Общая характеристика интеллектуального поведения животных, манипуляционная активность как основа их высших познавательных способностей. Характерные особенности и формы мышления у человекообразных обезьян. Биологическая ограниченность интеллекта животных.
реферат , добавлен 09.08.2009
Изучение видов тканей животных, а также функций, которые они выполняют. Особенности строения эпителиальной, соединительной, мышечной и нервной группы тканей. Определение месторасположения каждой группы и значения для жизнедеятельности организма животного.
презентация , добавлен 18.10.2013
Описание строения и морфологических особенностей птиц - теплокровных позвоночных, чье тело защищено перьевым покровом. Рассказы о странствующих голубях. Характеристика некоторых представителей класса млекопитающих: тасманского дьявола, тигра, кенгуру.
презентация , добавлен 28.11.2011
Различные способы передвижения у простейших животных, строение органелл передвижения. Таксисные реакции и необходимые условия их возникновения. Характеристика многощетинковых и монощетинковых червей, особенности их строения, тип питания и размножения.
Настоящий электронный дидактический комплекс (ЭДК) объединяет в себе несколько функций учебных материалов:
Информационная текстовая часть учебного курса «биохимия животных с основами физколлоидной химии».
Наглядные материалы (рисунки, схемы, таблицы).
Материалы для самоконтроля знаний обучающихся.
В текстовой части кратко изложены основные термины и понятия с выделением ключевых слов. В дополнительный блок ЭДК помещены краткие учебные пособия, методические разработки по биохимии животных.
Составители: з аведующий кафедрой органической и биологической химии Казанской государственной академии ветеринарной медицины доктор ветеринарных наук профессор Хазипов Нариман Залилович, доцент кафедры биохимии Казанского государственного университета Аскарова Альфия Наримановна, доценты кафедры органической и биологической химии Казанской государственной академии ветеринарной медицины доктор биологических наук Логинов Георгий Павлович, Тюрикова Раиса Павловна, Закирова Лилия Азатовна, ассистент кафедры Казанской государственной академии ветеринарной медицины Шилова Светлана Вячеславовна.
Техническое исполнение осуществлено кандидатом ветеринарных наук ассистентом КГАВМ Усольцевым Константином Валерьевичем.
При разработке ЭДК были использованы учебники «Биохимия животных» (Н.З.Хазипов, А.Н.Аскарова, 2003 г.), «Биохимия» (В.П.Козлов, В.Н.Шведова, 2004 г.), «Физическая и коллоидная химия» (М.М.Равич-Щербо, В.В.Новиков, 1975), «Методическое пособие по физической и коллоидной химии» (Р.П.Тюрикова, 2001 г.).
Физическая химия вода
Как известно, жизнь зародилась в воде и по-прежнему остается тесно связанной с водой. Вода является источником кислорода в атмосфере Земли. Это происходит при фотосинтезе в растениях, при этом энергия света преобразуется в энергию химических связей молекул. Животный мир может использовать только энергию, освободившуюся из этих химических связей в форме АТФ и других трифосфатов.
Вода составляет от 50 до 98% от общей массы организма. Каждая клетка и каждая ткань содержит определенное количество воды, так кожа содержит 72%, сердце – 79%, спинной и головной мозг – 70%, кровь – 79%, лимфа – 96%. С помощью воды осуществляется перенос питательных веществ и продуктов обмена веществ; вода играет важную роль в осмотических явлениях, в сохранении коллоидного состояния протоплазмы и т.д.
Вода обеспечивает растворение веществ, процессы всасывания, передвижения, набухания, осмоса и многих других. Высокая теплоемкость, теплопроводность, теплота испарения воды способствует поддержанию температуры тела у теплокровных животных. Она участвует в реакциях гидролиза, вызывает диссоциацию молекул (электролитов). Вода – конечный продукт обмена веществ в организме
Уникальные свойства воды Н 2 О становятся очевидными при сравнении с метаном (СН 4). Обе молекулы одинаковы по массе и размерам. Тем не менее температура кипения воды на 250°С выше по сравнению с температурой кипения метана. В результате вода на поверхности Земли находится в жидком, а метан – в газообразном состоянии. Высокая точка кипения воды является следствием высокой теплоемкости испарения, что в свою очередь обусловлено неравномерным распределением электронной плотности в молекуле воды. Молекула воды имеет форму тетраэдра, в центре которого расположен атом кислорода. Две вершины тетраэдра заняты свободными электронными парами атома кислорода, а остальные две – атомами водорода. Поэтому связи Н-О-Н расположены под углом друг к другу. Кроме того, из-за высокой электроотрицательности атома кислорода связь О-Н полярна. т. е. молекула воды представляет собой электрический диполь .
Каждая молекула тетраэдрически координирована с четырьмя другими молекулами воды, благодаря водородным связям энергия диссоциации водородной связи составляет 25 кДж/моль.
Биполярное строение молекул воды благоприятствует образованию водородных связей . Поэтому у воды в жидком состоянии многие молекулы связаны между собой водородными «мостиками». Часто образуются тетраэдрические структуры, так называемые "кластеры" воды. Поскольку в твердом состоянии расстояние между молекулами в среднем больше, чем в жидкости, плотность льда меньше по сравнению с плотностью воды. Это свойство воды очень важно в экологическом отношении, т.к. зимой на поверхности водоемов образуется слой льда, и они редко промерзают до дна.
Вода имеет высокую константу диэлектрической проницаемости, т.е. в воде электростатическое притяжение двух противоположно заряженных ионов снижается примерно в 80 раз.
В этом полярном растворителе (воде) хорошо растворяются полярные молекулы. Они окружаются молекулами воды, происходит гидратация молекул.
Электростатические силы притяжения удерживают молекулы воды, тем самым разрушая межионные или внутримолекулярные связи самой гидратированной молекулы.
Рис.1.1. Электростатические силы притяжения
Статья Е.Б. Бажибиной «Методический подход к интерпретации результатов биохимических исследований» в Российском ветеринарном журнале. Мелкие домашние и дикие животные, № 2, 2012 г., стр. 8-14.
Бажибина Елена Борисовна,
лаборатория «ВЕТЕСТ», Москва, Россия
Резюме
С появлением на отечественном рынке автоматического оборудования биохимический анализ сыворотки крови мелких домашних животных прочно вошел в повседневную практику ветеринарного врача. Сегодня постановка диагноза и мониторинг животных с заболеваниями внутренних органов (острая/хроническая почечная недостаточность, гепатит, панкреатит; эндокринологические патологии, нарушения минерального обмена и многое другое) практически невозможны без биохимического исследования.
Если анализы выполнены в одной лаборатории и, что особенно важно, если есть возможность проконсультироваться у врача-лаборанта относительно интерпретации полученных результатов, а также влияния на них физиологического состояния животного, условий взятия материала, транспортировки и т. д., то практикующий врач, как правило, не испытывает затруднений в постановке диагноза. Однако в повседневной практике приходится иметь дело с пациентами, поступающими на прием с целым «послужным списком», т. е. с результатами анализов, выполненных в нескольких лабораториях, различающихся по референсным значениям (диапазоны по каждому показателю, принятые в качестве нормы в конкретной лаборатории).
Как практикующему врачу оценить результаты биохимического анализа сыворотки крови, выполненного в лабораториях, оснащенных разным оборудованием, использующих различные методики? Как сравнивать референсные значения разных лабораторий и разные единицы измерения биохимических показателей? Эти и другие вопросы рассмотрены в данной статье.
Общие положения
По нашим наблюдениям, первое, на что обращают внимание врачи, оценивая результаты биохимического анализа, соответствуют ли показатели крови данным, полученным при клиническом исследовании пациента. Это неверный диагностический путь, поскольку выводы на основании такого сравнения полностью зависят от квалификации врача-клинициста. Необходимо придерживаться тактики комплексной постановки диагноза, согласно которой важно учитывать результаты широкого спектра исследований – клинического (осмотр, аускультация и т. д.), инструментального (ультразвукового, рентгенологического и т. д.), лабораторного (клинический и биохимический анализы крови, клинический анализ мочи), а также данных анамнеза.
Суммируя опыт коллег и свой собственный, можно сказать, что при оценке результатов биохимического анализа важно учитывать целый ряд факторов:1) референсные значения, принятые в лаборатории; единые коэффициенты пересчета (см. приложение); 2) особенности пациента – физиологические (возраст, пол, порода, стадия полового цикла) и поведенческие (в момент взятия крови и др.); 3) потенциальное воздействие терапевтических препаратов и иных факторов на показатели крови; 4) особенности транспортировки образца крови (соблюдались ли правила), дата/время взятия образца, проведения исследования; 5) отметки в бланке результатов о наличии в образце крови отклонений, способных исказить результат анализа(гемолиз, гиперлипидемия и др.); 6) особенности методик и оборудования, на котором выполнено исследование; 7) регулярный внешний контроль качества работы оборудования и соблюдение внутреннего регламента лаборатории, репутация в профессиональной среде; 8) возможность обращения в лабораторию, предоставившую результаты исследований, за консультацией специалиста о возможных причинах изменений показателей крови. Нужно учитывать и тот факт, что в задачи врача-лаборанта входит описание показателей крови, но не постановка диагноза, это является прерогативой врача-клинициста.
Референсные значения, принятые в лаборатории, единые коэффициенты пересчета
Референсные значения всех показателей каждая лаборатория определяет с учетом имеющегося оборудования, используемых методик и соответствующих калибровочных и контрольных материалов, а также справочных данных по всем параметрам крови и результатов контрольных исследований крови здоровых животных, проведенных для апробации каждого вида анализа. Существуют международные единицы (СИ) для ха-рактеристики параметров крови (ГОСТ 8.417-2002), принятые Международной Метрической Конвенцией. Результаты исследований, предназначенные для оценки врачами-клиницистами, надежные лаборатории предоставляют в единицах, сопоставимых с данными других лабораторий или приводят пересчетные коэффициенты.
Физиологические факторы, влияющие на биохимические показатели крови
К этим факторам относят возрастные, половые и породные особенности. Самые существенные различия в нормальных значениях показателей связаны с возрастом животных. Отклонения от средневидовой нормы (принятой в литературе) у молодых и старых животных могут составлять 25…100 % и более.
Рис. 1.
Наиболее значимые различия в физиологических параметрах крови выявляют при сравнении молодых и взрослых животных.
Изменения нормальных значений биохимических показателей крови, ассоциированные с возрастом и полом, обусловлены различиями в активности обменных процессов, в гормональном фоне, функциональной зрелости организма.
Возраст. У молодых животных по сравнению со взрослыми из-за относительно невысокой ферментативной активности печени, более высокого содержания плазмы на единицу объема крови, ускоренного синтеза белка снижены значения многих параметров белкового и ферментативного обменов (рис. 1): АлАТ, АсАТ, фибриноген, общий белок, альбумин, амилаза. Пониженное содержание мочевины обусловлено сочетанием ускоренного анаболизма белка и возрастной полидипсии и полиурии. Концентрация креатинина снижена вследствие малой массы тела . Любое увеличение содержания мочевины и креатинина в сыворотке следует рассматривать в соотношении с удельным весом мочи . Низкая концентрация холестерина в крови животных в возрасте до 6 мес. обусловлена высокой скоростью его расходования, что вызвано ускоренным ростом тканей, половым развитием и синтезом стероидных гормонов.
У молодых собак (у кошек в меньшей степени) повышены (относительно средневидовых норм) значения показателей минерального обмена – концентрация кальция и фосфора (вследствие активного роста скелета и высокой активности гормона роста). Активность ЩФ и ГГТ у щенков до 10-дневного возраста выше, чем у взрослых в 20…25 раз (могут достигать 8760 U/L и 3558 U/L соответственно). Активность данных ферментов возрастает в течение 24 ч после рождения и отражает интенсивность поглощения молозива, богатого ферментами, в то же время тканевые факторы в молозиве могут стимулировать эндогенный синтез ЩФ и ГГТ. Поэтому в первые дни жизни данные показатели нельзя использовать в диагностике расстройств гепатобилиарной системы. ЩФ и ГГТ могут служить критерием потребления щенками молозива. Начиная с 2-х недельного возраста щенка активность ЩФ и ГГТ в сыворотке крови снижается до 176…541 U/L и4…77 U/L, соответственно, и в возрасте 4-х недель до-ходит до 135…201 U/L и 2…7 U/L, соответственно .
Значения ЩФ могут превышать норму в 2…2,5 раза в период активного роста, особенно у собак крупных пород, за счет высокой активности костного изофермента. У котят в сыворотке крови увеличение активности ЩФ и ГГТ, в отличие от щенков, после приема молозива не наблюдают.
Более высокими у молодых животных, вследствие роста синтеза иммуноглобулинов, бывают показатели, связанные с иммунным статусом (глобулины, лимфоциты).
Во взятой натощак крови уровень желчных кислот у щенков и котят в возрасте 2-х мес. не имеет существенных отличий от взрослых животных. Однако во взятой натощак крови и сыворотке после приема пищи отмечена гипераммониемия (до 365 и 568 μmol/L соответственно) у здоровых щенков ирландского волкодава от 6-недельного возраста с нормализацией концентрации аммиака в 3…4-месячном возрасте . Диапазон физиологических концентраций натрия, калия, хлора у молодых собак и кошек соответствует нормам для взрослых животных .
Пол и порода. Традиционно разные условия содержания и кормления животных, выведение пород в разных географических местностях накладывают отпечаток на метаболические процессы в организме и даже определяют предрасположенность к некоторым заболеваниям на генетическом уровне. У самок ниже концентрация холестерина, а также активность большинства ферментов (АлАТ, КФК), но выше содержание фосфора и желчных кислот .
Существование породной вариабельности у кошек подтверждены многими исследователями и наблюдением врачей-клиницистов. Выявлена породная предрасположенность к определенным заболеваниям (например, кошки бирманской породы чаще заболевают вирусным инфекционным перитонитом или сахарным диабетом) . Достоверно доказано, что у бирманских кошек более широкий референсный интервал креатинина . При исследовании у кошек разных пород содержания глюкозы, мочевины, креатинина, протеина, альбумина, кальция, фосфора, натрия, калия, хлора, активности АлАТ, ЩФ наиболее значимые различия были выявлены в содержании креатинина, глюкозы, общего белка у кошек таких пород, как бирманская, шартрез, мейнкун и персидская. У здоровых кошек данных пород средние значения показателей были сопоставимы с референсными, а верхние границы показателей увеличены на 20…25 % .
Породные различия у собак более выражены, чем у кошек, что объясняется большими колебаниями в массе тела (от чихуахуа до ирландского волкодава), условиями содержания (комнатные собачки, гончие, охотничьи, сторожевые и т. д.). При исследовании стерилизованных собак среднего возраста (маламут, хас-ки, голден ретривер, английский сеттер) отмечено, что средние значения показателей примерно одинаковые, зато значения верхней и нижней границы существенно различаются (разброс):
- креатинин: маламут и голден ретривер – до133 μmol/L, референсные значения у всех исследуемых пород – 88…106 μmol/L;
- мочевина: английский сеттер – до 11,4 mmol/L, среднее значение по всем породам – 2,9…8,9 mmol/L ;
- магний: голден ретривер – нижняя граница 0,58 mmol/L, среднее значение 0,62…0,9 mmol/L;
- глобулин: маламут – до 45 g/l, референсные значения 24…38 g/l;
- ЩФ: хаски – до 203 U/L, сеттер – до 117 U/L ,референсные значения 10…92 U/L. По данным зарубежных коллег, эти породы склонны к гепатопатиями холестазу ; завышенные значения ЩФ могут быть связаны с атипичным адренокортицизмом, к которому склонны собаки породы сеттер ;
- ГГТ: сеттер – до 11,0 U/L, норма 1…6 U/L;
- глюкоза: хаски – до 7,2 mmol/L, среднее значение 4,2…6,4 mmol/L;
- холестерин: маламут – до 9,38 mmol/L, сеттер –до8,73, средние значения 3,55…8,75 mmol/L;
- амилаза: ретривер – до 1158 U/L, сеттер –до 1293, средние значения 162…974 U/L.
Существуют данные по увеличению активности АлАТ, АсАТ и ГГТ у гончих с возрастом и в зависимости от физической нагрузки .
У собак породы бернский зиненхунд при сравнении 21 биохимического показателя от принятых референсных значений отличались ЩФ – до 464 U/L, референсные до 174 U/L, амилаза – 285…1255 U/L, референсные 186…798 U/L; холестерин – 5,29…10,08 mmol/L, референсные 3,5…6,99 mmol/L . Надо отметить, что более высокая активность амилазы без соответствующего повышения активности липазы малоинформативна, а более высокая концентрация холестерина может быть истолкована как предрасположенность к нефропатиям. Кроме того, собаки породы зинненхунд предрасположены к злокачествен-ному гистиоцитозу, течение которого негативно влияет на печень, об этом может свидетельствовать и повышение активности ЩФ .
У собак породы борзая значительно выше значения креатинина (до 186 μmol/L) и КФК, причем повышение значений этих показателей находятся в прямой зависимости от физической нагрузки . Активность печеночных ферментов – АлАТ, АсАТ, ЩФ у них также значительно выше, чем референсные значения для собак в целом, увеличено рСО2 без явных признаков алкалоза. У активно работающих собак снижены показатели кальция, фосфора, тиреодных гормонов (Т4 и Т4 свободный), но повышена концентрация глюкозы по сравнению с референсными значениями .
Наилучший способ выявить отклонения от физиологических норм у каждого конкретного животного – это оценивать параметры крови в динамике (при регулярном диспансерном исследовании, начиная с молодого возраста).
Различия результатов биохимического анализа в зависимости от оборудования
До 70 % ошибок, искажающих результаты исследований, связаны с преаналитическим этапом (табл. 1). Присутствие в сыворотке посторонних частиц искажает результаты фотометрии, т. к. метаболиты разрушенных клеток, пигменты, крупномолекулярные соединения могут вступать в реакцию с определяемым веществом или компонентами рабочего реактива, влиять на активность ферментов .
Таблица 1. Погрешности преаналитического этапа.
Хилез – помутнение сыворотки/плазмы крови, обусловленное содержанием в ней большого количества жиров; ведет к завышению значений печеночных трансфераз; глюкозы, билирубина, холестерина, триглицеридов, желчных кислот, амилазы и др.; к занижению значений натрия, хлора, ГГТ.
Гемолиз – избыточный выход гемоглобина в сыворотку крови вследствие разрушения эритроцитов; ведет к завышению значений билирубина, КФК, альбумина, протеина, АлАТ; к занижению показателей ЩФ, желчных кислот, амилазы, ГГТ и т.д.
Прием лекарственных препаратов может сопровождаться изменением течения патологических процессов и сдвигами определенных показателей, относительно физиологической нормы. Например: сульфаниламиды приводят к повышению концентрации билирубина, преднизолон – глюкозы; фенобарбитал – увеличению активности печеночных транфераз; цефалоспорины обусловливают положительную реакцию на глюкозу в моче .
Напомним, что билирубинемия – повышенное содержание билирубина в крови, отражает патологические процессы, происходящие в организме, сопровождающиеся значительным разрушением функциональных элементов печени (гепатоцитов), увеличением активности печеночных трансфераз, содержания пигментов печени и понижением количества синтезируемых в печени веществ (альбумина, холестерина и др.). Повышенное содержание билирубина в крови характеризует патологические процессы, происходящие в организме, а не ошибки преаналитического этапа.
Автоматическое оборудование для биохимического анализа
Существует несколько типов биохимических анализаторов, принципиально различающихся по применяемым методикам. В зависимости от используемых реагентов различают биохимические анализаторы на жидких реагентах, или «жидкая химия», и использующие «сухую» химию, которые в свою очередь подразделяются на «сухую» стриповую и «сухую» слайдовую. Каждый из этих типов имеет свои особенности, преимущественно касающиеся технических аспектов установленных методик, оценки получаемых результатов, возможных погрешностей под действием различных внешних факторов.
Рис. 2.
Анализаторы, основанные на использовании сухих реагентов в качестве «стрипов», малоинтересны для биохимического анализа крови. Их недостатки: высокая погрешность результатов, большое число факторов, способных повлиять на результат, невозможность достойного контроля качества и низкая сопоставимость результатов. Примером могут служить анализаторы для клинического исследования мочи и портативные глюкометры.
Анализаторы, использующие жидкие реагенты, широко распространены в медицине человека и достаточно давно применяются в ветеринарной медицине. Анализаторами этого типа оснащены крупные лаборатории и научно-исследовательские центры. Принцип работы большинства фотометров и биохимических анализаторов «жидкой» химии основан на турбидиметрическом методе (измерение интенсивности света, прошедшего через анализируемую суспензию). Основные погрешности, сопутствующие данному методу (при условии качественной калибровки) могут быть связаны с частичным отражением света от поверхностей кюветы. Статистически доказанная погрешность – уменьшение значений около 9,2 %, что учитывают в методиках . Многоразовое использование кювет и роторов обусловливает погрешность при исследовании минерального состава сыворотки крови (за счет примесей воды). К увеличению значений плотности исследуемого раствора (сыворотки, мочи) приводят и различные примеси органического и неорганического происхождения (разрушенные клетки, белки, жиры, частицы шерсти и пыли), которые уменьшают интенсивность регистрируемого фотодиодом проходящего света, а при пересчете увеличивают значение определяемого параметра (рис. 2).
Анализаторы «сухой» химии получают все большее распространение и в медицине и в ветеринарии, что обусловлено изобретением и внедрением слайдовой технологии, позволяющей минимизировать артефакты (хилез, остатки разрушенных клеток, загрязнение пробы микрочастицам пыли и т. д.). Слайдовая технология биохимического анализа сыворотки крови незаменима в условиях небольших клиник и ветеринарных кабинетов, при возникновении экстренных состояний, когда нет возможности или времени доставить пробы в лабораторию, а результаты нужны срочно.
Рис. 3.
Принцип слайдовой технологии основан на измерении и оценке отраженного (а не проходящего, как в «жидкостных» анализаторах) света. Технология слайда предусматривает несколько слоев, через которые проходит исследуемый образец. После распределения образца на первом слое, на втором происходит фильтрация крупномолекулярных соединений. Таким образом, на реакционный слой попадают только компоненты с малой молекулярной массой. Третий слой – индикационный (реакционный), где происходит реакция и с которого считываются данные по изменению окраски и оптической плотности, исключая, таким образом, воздействие многих артефактов (рис. 3, 4). Измеренная оптическая плотность преобразуется в значение концентрации на основе калибровочной кривой, имеющейся в памяти анализатора.
Рис. 4.
Для практикующего ветеринарного врача могут быть интересны некоторые принципиальные отличия анализаторов, использующих для исследований «сухую» и «жидкую» химию (табл. 2).
Таблица 2. Сравнительные параметры анализаторов «сухой» и «жидкой» химии.
Анализаторы на «жидкой» химии |
Анализаторы на «сухой» химии |
Обладают достаточной точностью при соблюдении строгого внутри- и межлабораторного контроля качества |
Обладают высокой точностью за счет заводской калибровки и подготовки реагентов, исключающей «человеческий фактор» |
Широкая доступность калибровочных и контрольных материалов |
Более широкие пределы линейности* измерения, нежели в жидкостных анализаторах |
Лабильность в хранении реагентов |
Строгие ограничения в хранении реагентов |
Низкая стоимость реагентов (себестоимость анализа) |
Высокая стоимость расходных материалов (себестоимость анализа) |
При значениях, превышающих линейность метода*, погрешность исследования возрастает за счет ручного разведения образца |
|
При многоразовом использовании кювет и роторов может увеличиться погрешность измерения минерального состава сыворотки крови за счет примесей воды |
Технология «слайда» позволяет исключить погрешности измерения оптической плотности, связанные с загрязнением пробы посторонними крупномолекулярными частицами и жировыми каплями |
Невозможно исключить артефициальное изменение параметров исследования при гемолизе и гипербилирубинемии |
|
Можно исследовать любые прозрачные и полупрозрачные среды (сыворотка крови, плазма, моча, выпотные жидкости) |
Можно исследовать сыворотку крови, мочу, цельную кровь |
* Линейность метода - интервалы значений показателя, при которых производитель реагентов гарантирует достоверный результат. Ряд биохимических показателей имеет значительные различия линейности в зависимости от установленных на анализаторе методик. Так, линейность метода подсчета концентрации глюкозы Human до 22,9 ммоль/л, Idexx до 38,1 ммоль/л; ЩФ Human до 700 U/L, Idexx до 2000 U/L. |
|
Если врач получает результат, выходящий за пределы линейности установленной методики, надо иметь в виду, что при подсчете данного показателя сыворотка была разведена и, следовательно, погрешность измерения увеличилась.
Мы постарались осветить некоторые аспекты биохимического анализа крови, способные влиять на получаемый результат. Для контроля результатов некорректно дублировать анализ в другой лаборатории, особенно спустя несколько дней, т. к. там могут быть принципиально другие оборудование и установленные методики. В качестве рекомендации хочется напомнить, что уточнить «непонятные» можно с помощью дифференциальных (дополнительных) тестов или процедур (пример: при превышающей физиологические норму глюкозе рекомендуют исследовать фруктозамин или гликерированный гемоглобин; при повышении почечных показателей – функциональные тесты почечной фильтрации: фракционной экскреции электролитов, скорости клубочковой фильтрации и прочее).
Приложение. Коэффициенты пересчета единиц.
Показатели |
Коэффициент пересчета |
Единицы СИ |
Мочевина |
||
Креатинин |
||
Общ.билирубин |
||
Прямой билирубин |
||
Мочевая к-та |
||
Лактатдегидрогеназа (ЛДГ) |
||
Аспартатаминотрансфераза (АСТ) |
||
Аланинаминотрансфераза (АЛТ) |
||
α-Амилаза |
||
Креатинфосфокиназа (КФК) |
||
Сорбидолдегидрогеназа (СДГ) |
||
Гамма-глютамилтрансфераза (ГГТ) |
||
Щелочная фосфатаза |
||
Общий белок |
||
Альбумин |
||
Глобулин |
||
Фибриноген |
||
Холестерин |
||
Триглицериды |
||
Библиография
1. Камышников В.С. Справочник по клинико-биохимическим исследованиям и лабораторной диагностике, 3-е изд., Москва, изд. «МЕДпресс-информ», 2009, 196с.
2. Меньшиков В.В. Критерии оценки методик и результатов клинических лабораторных исследований, справочное пособие: - Москва, изд. Лабора, 2011. – 328с.
3. Словарь-справочник. - Москва, Издательство стандартов, 1990, ISBN 5-7050-0118-5
4. Butterwick RF, McConnell M, et al. Influence of age and sex on plasma lipid and lipoprotein concentrations and associated enzyme activities in cats. Am J Vet Res 62:331-336, 2001.
5. Center SA, Randolph JF, et al. Effect of colostrum ingestion on gamma-glutamyltransferase and alkaline phosphatase activities in neonatal pups. Am J Vet Res 52:499-504, 1991.
6. Concordet D, Vergez F, Trumel C, et al. A multicentric retrospective study of serum/plasma urea and creatinine concentrations in dogs using univariate and multivariate decision ruled to evaluate diagnostic efficacy. Vet Clin Pathol. 2008; 37:96–103.
7. Dunlop MM, Sanchez-Vazquez MJ, Freeman KP, Gibson G, Sacchini F, Lewis F. Determination of serum biochemistry reference intervals in a large sample of adult greyhounds. J Small Anim Pract.
8. Gunn-Moore DA, Dodkin SJ, Sparkes AH. An unexpectedly high prevalence of azotemia in Birman cats (letter). J Feline Med Surg 2002;4:165–166.
9. Driscoll CA, Menotti-Raymond M, Roca AL, et al. The Near Eastern origin of cat domestication. Science 2007;27:519–523.
10. Fettman MJ and Allen TA. Developmental aspects of fluid and electrolyte metabolism and renal function in neonates. Comp Contin Ed Pract Vet 13:392-403, 1991.
11. Jubb KVF. The Pancreas. In: Jubb KVF, Kennedy PC, Palmer N, eds. Pathology of Domestic Animals. 1st ed. San Diego, CA: Academic Press Inc.; 1993:407–424.
12. Harper EJ, Hackett RM, Wilkinson J, et al. Age-related variations in hematologic and plasma biochemical test results in Beagles and Labrador Retrievers. J Am Vet Med Assoc 2003;223.
13. Hoskins JD. Veterinary Pediatrics. Dogs and Cats from Birth to Six Months (3rd ed.), WB Saunders Company, Philadelphia, 2001.
14. Lederer R, Rand JS, Jonsson NN, et al. Frequency of diabetes mellitus and breed predisposition in domestic cats in Australia. Vet J 2009;179:254–258.
15. Lipinski MJ, Froenicke L, Baysac KC, et al. The ascent of cat breeds: Genetic evaluations of breed and worldwide randombreed populations. Genomics 2008;91:12–21.
16. Lowseth LA, Gillett NA, Gerlach RF, Muggenburg BA. The effects of aging on hematology and serum chemistry values in the beagle dog. Vet Clin Pathol. 1990;19:13–19.
17. McCann TM, Simpson KE, Shaw DJ, et al. Feline diabetes mellitus in the UK: The prevalence within an insured cat population and a questionnaire-based putative risk factor analysis. J Feline Med Surg 2007;9:288–299.
18. Nestor DD, Holan KM, Johnson CA, SchallW, Kaneene JB. Serum alkaline phosphatase activity in Scottish
19. Terriers versus dogs of other breeds. J Am Vet Med Assoc.,
20. Pesteanu-Somogyi LD, Radzai C, Pressier BM. Prevalence of feline infectious peritonitis in specific cat breeds. J Feline Med Surg 2006;8:1–5.
21. Whincup PH, Gilq JA, Owen CG, et al. British South Asians aged 13–16 years have higher fasting glucose and insulin levels than Europeans. Diabet Med 2005;22:1275–1277.
22. Reusch C, Hoerauf A, Lechner J, et al. A new familial glomerulonephropathy in Bernese mountain dogs. Vet Rec. 1994;134:411–415.
23. Zandvliet MMJM and Rothuizen J. Transient hyperammonemia due to urea cycle enzyme deficiency in Irish wolfhounds. J Vet Intern Med 21:215-218, 2007.
24. Zimmerman K, Panciera D, Panciera R. Hyperalkaline phosphatemia in Scottish Terriers caused by atypical adrenal cortical disease . Vet Clin Pathol.
2007;36:312.
«Прощание с Матёрой Прощание с матерой читать краткое по главам
Правление Екатерины II Просвещенный абсолютизм Екатерины II
Юрий болдырев - как избежать гражданской войны